Revista de Ciencias Tecnológicas (RECIT). Volumen 3 (1): 10-22
Revista de Ciencias Tecnológicas (RECIT). Universidad Autónoma de Baja California ISSN 2594-1925
Volumen 5 (3): e236. Julio-Septiembre, 2022. https://doi.org/10.37636/recit.v5n3e236.
ISSN: 2594-1925
1
Artículo de investigación
Evaluación de toxicidad de nanogeles termosensibles en
modelo in vivo
Toxicity evaluation of thermosensitive nanogels in an in vivo model
Alondra Montañez-Ríos1, Aracely Serrano-Medina2, Juan M. Irache3, Ana Luisa
Martínez-López3, Ignacio Rivero4, José Manuel Cornejo-Bravo1*
1Universidad Autónoma de Baja California, Facultad de Ciencias Químicas e Ingeniería, Calzada Universidad
14418, Parque industrial Internacional, Tijuana, Baja California, México, C.P. 22427.
2Universidad Autónoma de Baja California, Facultad de Medicina y Psicología, Calzada Universidad 14418,
Parque industrial Internacional, Tijuana, Baja California, México, C.P. 22427.
³NANO-VAC Research Group, Department of Chemistry and Pharmaceutical Technology, University of Navarra,
Pamplona 31080, Spain.
4Tecnológico Nacional de México/I. T. Tijuana. Centro de Graduados e Investigación en Química, Blvd. Alberto
Limón Padilla S/N, 22510 Tijuana, Baja California, México.
Autor de correspondencia: José Manuel Cornejo Bravo, Universidad Autónoma de Baja California, Facultad de
Ciencias Químicas e Ingeniería, Calzada Universidad 14418, Parque industrial Internacional, Tijuana, Baja
California, México, C.P. 22427. E-mail: jmcornejo@uabc.edu.mx. ORCID 0000-0002-0013-8937.
Recibido: 6 de Septiembre del 2022 Aceptado: 27 de Septiembre del 2022 Publicado: 30 de Septiembre del 2022
Resumen. ₋ Este estudio utiliza C. elegans para evaluar la toxicidad de los nanogeles (NG) copoliméricos
de N-isopropilacrilamida (NIPAAm) y metacrilato de 2-(dietilamino)etilo (DEAEM), preparados
mediante polimerización en emulsión sin tensoactivo utilizando polietilenglicol monometil éter
metacrilato (PEGMA) como estabilizador reactivo. Los nematodos ingirieron NG marcados con
fluoresceína, como se demostró mediante microscopía de fluorescencia. Se utilizaron dos iniciadores
diferentes, catiónicos y aniónicos para iniciar la síntesis de los NG. Los resultados demuestran que ambos
tipos de NG afectan el tamaño y la reproductividad de los nematodos. C. elegans es un modelo
pluricelular potencial para evaluar la toxicidad de los NG sensibles, evitando el uso de mamíferos para
las evaluaciones.
Palabras clave: Nanogeles; C. elegans; NIPAAm; Toxicidad.
Abstract. ₋ This study uses C. elegans to assess the toxicity of copolymeric nanogels (NG) of N-
isopropylacrylamide (NIPAAm) and 2-(diethylamino)ethyl methacrylate (DEAEM), prepared by
surfactant-free emulsion polymerization using polyethylene glycol monomethyl ether methacrylate
(PEGMA) as a reactive stabilizer. Nematodes ingested fluorescein-labeled NG, as demonstrated by
fluorescence microscopy. Two different initiators, cationic and anionic, were used to initiate the synthesis
of the NG. The results indicate that both types of NG affect the size and reproducibility of nematodes. C.
elegans is a potential multicellular model to evaluate the toxicity of sensitive NG, avoiding the use of
mammals for evaluations.
Keywords: Nanogels; C. elegans; NIPAAm; Toxicity.
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1. Introducción
Los nanogeles térmicamente sensibles (NG)
exhiben una cambio en su transición de
hinchamiento y contracción a una temperaturas
de transición critica baja (LCST) [1]. Una
alternativa de gran utilidad es poli(N-
isopropilacrilamida) (PNIPAAm) es el polímero
termosensible más ampliamente estudiado con
una LCST de 32 °C [2, 3]. Esta temperatura es
cercana a la temperatura corporal por lo que los
nanogeles y microgeles de NIPAAm tienen un
gran potencial en aplicaciones biomédicas como
liberación controlada de fármacos [4, 5], y
portadores de genes [6, 7], así como materiales
de terapia dirigida a patologías donde se genera
un cambio en la temperatura [8–12] y materiales
embólicos de vasos sanguíneos [13].
Una preocupación con el monómero y los
polímeros de NIPAAm es su toxicidad. Se han
realizado varios estudios para evaluar la
toxicidad de NIPAAm y sus productos
poliméricos en cultivos celulares [14]. Por
ejemplo, Wadajkar et. al demostraron que los
monómeros de NIPAAm son citotóxicos,
mientras que las nanopartículas de PNIPAAm
son compatibles a una concentración de 5 mg/mL
o inferior para fibroblastos, células de músculo
liso y células endoteliales, incluso cuando queda
una pequeña cantidad del monómero en el
material [15]. En cuanto a los estudios de
toxicidad en animales, Malonne et al. estudiaron
la toxicidad después de la administración oral de
copolímeros de PNIPAAm a ratones; no
encontraron toxicidad a 400 mg/kg de peso
corporal [16]. En otro estudio, se evaluó el efecto
de inyecciones intravítreas de PNIPAAm como
adhesivo tisular en conejo. Los investigadores
encontraron que PNIPAAm no era tóxico en este
estudio [17].
La capacidad de administrar fármacos y material
genético en las células depende de la carga
superficial del nanomaterial. Se ha establecido
que las nanopartículas catiónicas tienen la
capacidad de penetrar en las células, presentando
una mayor eficacia para la obtención de
imágenes, la transferencia de genes y la
administración de fármacos [18].
Las nanopartículas tienen la condición de
mejorar la estabilidad y la solubilidad de las
cargas encapsuladas, fomentando el transporte a
través de membranas y prolongando los tiempos
de circulación para aumentar la seguridad y la
eficacia [19, 20].
Sin embargo, las nanopartículas con carga
positiva presentan mayor citotoxicidad que las
nanopartículas con carga negativa [21].
Como se observó anteriormente, la mayoría de
las evaluaciones de toxicidad se realizan en
cultivos celulares. Surgen preocupaciones sobre
el número limitado de líneas celulares estudiadas
en las evaluaciones de toxicidad considerando las
diferencias en los mecanismos de absorción del
material, la sensibilidad celular, etc. Es, por lo
tanto, necesario utilizar un modelo pluricelular
para una mejor predicción de la toxicidad de los
nanomateriales en humanos.
Las diferencias entre especies no son el único
factor que limita la traducción clínica, también la
diversidad entre pacientes puede limitar el éxito
de los nanomedicamentos [22].
Muchas de las primeras iteraciones de NP no
pudieron superar estas barreras biológicas para la
entrega, pero los diseños de NP más recientes han
utilizado avances en estrategias de síntesis
controlada para incorporar estructuras complejas,
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fracciones biosensibles y agentes para mejorar la
entrega [23, 24].
Caenorhabditis elegans (C. elegans) es un
nematodo de vida libre de 1 mm de largo que fue
postulado como modelo animal en 1965 por
Sydney Brenner [25]. Existe una superposición
sustancial entre C. elegans y los seres humanos
con respecto a los genes y las vías bioquímicas
[26]. Los análisis bioinformáticos sugieren que
entre el 38% y el 40% de los genes del gusano
son homólogos a los humanos [27]. En entornos
de laboratorio, C. elegans ingiere Escherichia
coli OP50 de la dieta bombeándolos a la boca y
concentrándolos en la faringe antes de pasar al
intestino [28, 29]. C. elegans es un organismo
muy simple. Consta de cinco parejas de
cromosomas autosómicos y una pareja de
cromosomas sexuales, siendo su tamaño de 100
millones de pares de bases de nucleótidos; veinte
veces mayor que el genoma de E. coli y sobre
1/30 parte del genoma humano [30, 31]. El
hermafrodita adulto tiene exactamente 959
células somáticas [32].
Los factores genéticos y ambientales que afectan
a C. elegans son similares a aquellos que afectan
a humanos, principalmente estrés oxidativo,
restricción calórica y reducción en la masa
muscular (sarcopenia) [33].
El reflejo de bombeo permanente en la faringe de
C. elegans se ha aplicado para estudiar la
digestión, la absorción y la bioactividad de las
nanoemulsiones [34, 35].
En este trabajo, estudiamos el efecto de la
ingestión por parte de C. elegans de NG
copoliméricos de NIPAAm y el monómero
básico DEAEM preparado por polimerización en
emulsión sin jabón utilizando una forma
polimerizable de polietilenglicol como
estabilizador (polietilenglicol monometil
metacrilato de éter) [36, 37]. Se utilizaron dos
iniciadores para la síntesis de los NG, aniónico y
catiónico.
2. Materiales y métodos
2.1. Materiales
N-isopropilacrilamida (NIPAAm) (Tokio
Chemical Industry CO., LTD) se purificó
mediante recristalización en hexano, 2-
(dietilamino) metacrilato de etilo (DEAEM) se
purificó mediante destilación a presión reducida.
El dimetacrilato de etilenglicol (EGDMA) se
purificó pasándolo a través de una columna
rellena con resina eliminadora de hidroquinona y
metilhidroquinona (ALDRICH). Diclorhidrato
de 2,2-azobis-(2-metilpropionamina) (AIBA),
persulfato de amonio (APS) (ALDRICH),
polietilenglicol-metil éter metacrilato (PEGMA)
con un peso de 2.080 g/mol. El metacrilato de
fluoresceína fue sintetizado en el laboratorio de
Biofarmacia UABC. C. elegans, E. coli OP50
fueron proporcionados por la Universidad de
Navarra España.
2.2. Síntesis de nanogeles
Se sintetizaron NG NIPAAm:PEGMA:DEAEM
47:41:12 w% utilizando EGDMA como
reticulante (3% mol con respecto a NIPAAm). Se
disolvió un total de 500 mg de monómero en 50
ml de agua MiliQ. La solución se desgasificó con
nitrógeno durante 30 min y posteriormente se
calentó a 85 °C durante 30 minutos. Se añadieron
AIBA o APS (2% mol con respecto a NIPAAm).
Se preparó un lote de nanogeles que contenían
metacrilamida de fluoresceína (0,5% mol con
respecto a NIPAAm) usando APS como
iniciador. En todos los casos, la reacción se llevó
a cabo durante 45 minutos. Después de eso, los
nanogeles se sometieron a diálisis contra agua
para su purificación durante 5 días. El diámetro
hidrodinámico, Dh, se obtuvo por dispersión de
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luz dinámica (DLS) usando el Zetasizer NanoNS
(DTS1060; instrumental Malvern). El efecto de
la temperatura sobre el tamaño de los nanogeles
se evaluó de 20 a 50 °C.
2.3. Microscopia electrónica de barrido de
emisión de campo
Las imágenes de microscopia electrónica de
barrido de emisión de campo (FESEM) de las
MG se adquirieron con un microscopio
electrónico de barrido de emisión de campo,
modelo JSM-7800F Prime. Con este fin, se
esparció una gota de dispersión de
micropartículas (0,4% en peso) sobre la
superficie de una rejilla de cobre recubierta de
carbón de malla 400. Se añadieron dos gotas de
acetato de uranilo (2% en peso) a la rejilla. Las
muestras se secaron en horno de vacío a 22°C
durante 24 h. Las muestras secas se sujetaron a
una varilla de muestras FESEM, se insertaron en
la cámara de muestras y se observaron a 25 kV.
2.4. Preparación de placas con medios de
crecimiento de nematodos (NGM).
Se preparó 1 L de agar para nematodos, con 3 g
de NaCl, 27 g de agar bacteriológico, 2,5 g de
pepsina, 965 mL de agua, 1g de CaCl2. Los
medios se esterilizaron en autoclave.
Posteriormente se adicionó 1 mL de colesterol (5
mg/mL), 1 g MgSO4, KH2PO4 (1 M) 25 mL,
nistatina 10 mL (5 mg/mL), ampicilina 1 mL (5
mg/mL).
2.5. Colocación de los NG
En el fondo de las placas se colocaron 250 uL de
NG, se colocaron 3.75 mL de agar preparado, se
dejó secar y se agregaron 250 uL de NG. El
estudio se realizó por triplicado. Por otro lado, se
preparó una placa de control sin NG.
2.6. Colocación de C. elegans en placas
Para las pruebas de toxicidad, los nematodos se
sincronizaron con la etapa de desarrollo L1
utilizando el método de sincronización de cloro.
Después de la eclosión de los gusanos (mínimo
de 19 horas), se centrifugaron a 1400 rpm durante
4 minutos y se eliminó el sobrenadante. Se
tomaron 10 µL del sedimento en un portaobjetos
para observar al microscopio y contar los
gusanos. Se colocó el volumen de sedimento
necesario para tener un mínimo de 400
nematodos por caja Petri. Las placas se
resguardaron a 20 °C durante 1-2 días hasta su
desarrollo, sin que las larvas superaran el estadio
L4.
2.7. Ingestión de los nanogeles por C.
elegans
Para determinar si las nanopartículas fueron
ingeridas por gusanos, se cultivaron nematodos
N2 sincronizados en placas NGM bacterianas
OP50 con NG marcados con fluoresceína.
Después del tratamiento durante 2 h, los
nematodos se lavaron tres veces durante 30 s en
medio M9 y luego se colocaron en portaobjetos
preparados con almohadillas de agar al 2%
frescas. Los nematodos fueron anestesiados con
azida de sodio (1%).
La presencia de NG marcados con fluoresceína
ingeridos por los gusanos se visualizó en un
microscopio de fluorescencia (Axioimager M1,
Zeiss, Alemania) con una cámara acoplada
(Axiocam Icc3, Zeiss, Alemania) y una fuente
fluorescente (HBO 100, Zeiss, Alemania). Las
imágenes fueron capturadas con el software ZEN
(Zeiss, Alemania).
2.8. Tinción rojo Nilo
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Los gusanos L4 cultivados en diferentes
condiciones (concentraciones de nanogeles) se
recolectaron y lavaron con Triton X-100 al
0,01% en solución salina tamponada con fosfato
(PBST) y se fijaron en isopropanol al 40%
durante 3 min. La tinción se realizó mediante la
adición de una solución de rojo Nilo (3 µg/ml) y
la incubación (30 min) con balanceo suave a
temperatura ambiente en la oscuridad. Los
gusanos se lavaron en PBST y se montaron en
una almohadilla de agarosa al 2% para
visualización microscópica.
Se capturaron imágenes fluorescentes de gusanos
teñidos con rojo Nilo en un estereomicroscopio
Nikon SMZ18 (Nikon Instruments Inc., Japón)
equipado con un sistema de epifluorescencia y
una cámara digital a color refrigerada DS-FI1C.
Las imágenes se tomaron bajo un filtro GFP (Ex
480-500, DM 505; BA 535-550). El análisis de
imágenes se realizó utilizando el programa
ImageJ.
2.9. Estudio de tamaño de C. elegans
Al microscopio (Nikon SMZ18 Research
Stereomicroscope) se tomaron al menos 30 fotos
por placa para estudio luego de realizar la tinción
correspondiente descrita anteriormente, luego de
tomar las fotos se guardaron para estudiar el
volumen y contenido de grasa del nematodo con
el software ImagenJ-Win64.
2.10. Análisis estadístico
Todos los cálculos fueron analizados con IBM
SPSS. Los experimentos se llevaron a cabo por
triplicado en condiciones similares. Los
resultados se expresaron como la media ± DE. Se
consideraron diferencias estadísticamente
significativas cuando el valor de p fue inferior a
0,05.
Se calcularon las medias y los errores estándar.
Para las comparaciones de grupos en el estudio in
vivo, los datos se analizaron mediante análisis de
varianza unidireccional (ANOVA) seguido de
una prueba de comparación múltiple de Tukey-
Kremer con el software estadístico NCSSTM 11
(NCSS, LCC. Kaysville, EE. UU.). EE.UU). La
diferencia se consideró significativa cuando p
<0,05 o p <0,001.
3. Resultados
3.1. Síntesis y caracterización de nanogeles
Los nanogeles se produjeron de manera eficiente
con rendimientos superiores al 80%. La Figura 1.
muestra la distribución de tamaño de los
nanogeles iniciados con AIBA (A) y la
distribución de tamaño iniciados con APS (B). Se
observa un diámetro hidrodinámico (Dh) de 150
nm, así como un índice de polidisperción de (PDI
= 0,198) para los NG iniciado con AIBA,
mientras que para el NG iniciado con APS se
obtiene un Dh de 160 nm y un (PDI = 0,194) y
una temperatura de transición similar de 36 °C.
En las dos síntesis el tamaño de los nanogeles son
óptimas ya que permite la evaluación de
toxicidad en los nematodos, el índice de
polidisperción es el adecuado nos dice que los
NG se encuentras distribuidos de una forma
uniforme. Los tamaños nanométricos de los NG
se corroboran con microscopia electrónica de
barrido de emisión de campo (FESEM) que se
muestran en la (Figura 2).
La sensibilidad a la temperatura se presenta en la
Figura 1. de 20 °C a 50 °C con una transición
discontinua y un LCST así como su sensibilidad
a la temperatura en agua AIBA (A1) y APS (B1).
Ambos nanogeles presentan una temperatura de
transición (LCST) de 36 °C ya conocida y
estudiada pues por estudios anterior se sabe que
NIPAAm tiene una LCST de 32 °C cercana a la
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temperatura corporal, y la incorporación de
monómeros hidrofílicos incrementa la LCST.
Figura 1. Distribución de tamaños de nanopartículas a 25 °C iniciadas con AIBA (A) o APS (B). Sensibilidad a la temperatura
de los NGs con AIBA (A1) y APS (B1).
Figura 2. Imágenes de microscopio electrónico de barrido de emisión de campo (FESEM) de nanogeles iniciados con AIBA
(A) y APS (B).
(A)
(B)
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3.2. Ingestión de los nanogeles por C.
elegans
En la Figura 3, se muestra la ubicación de los
NGs marcados con fluoresceína en todo el tracto
digestivo de C. elegans, lo que demuestra la
ingestión de materiales por parte del nematodo,
teñido con rojo Nilo para observar el interior del
nematodo.
Figura 3. a) Muestra el control de la ingesta de NG por C. elegans, b) muestra la ingestión de NG marcado con fluoresceína
por C. elegans.
3.3. Estudio de toxicidad.
En la Figura 4 se presentan los datos de toxicidad
en C. elegans, se observó que en la gráfica (A)
que los nematodos que ingirieron NG son más
pequeños comparados con el control (NGM),
pero también se observó que tienen mayor
cantidad de grasa, esto nos lleva a los resultados
de la gráfica (B) donde evaluamos la relación
grasa/volumen que nos indica que los nematodos
son de tamaño pequeño, pero tienen un mayor
volumen, esto comparando con el control, con lo
que podemos concluir los nanogeles tienen efecto
en el tamaño del nematos teniendo un nematodo
más pequeños pero aumentando su volumen
generando un gusano más gordos.
Figura 4. Estudios de toxicidad con respecto al volumen y grasa en C. elegans, donde en la imagen A se muestra el volumen
y grasa del nematodo en términos de porcentaje (%) y en la imagen B se muestra el radio de la grasa y volumen del nematodo
comparado con el control (NGM).
(A)
(B)
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4. Discusiones
En microscopía de fluorescencia se observa que
los nanogeles se distribuyen por todo el sistema
gastrointestinal y digestivo del nematodo, lo que
nos demuestra que C. elegans ingiere los
biomateriales, ya que estos tienen un tamaño
adecuado (120 a 180 nm) para poder ser ingerido
por este tipo de nematodo, En estudios de
toxicidad se concluyó que los nanogeles que se
iniciaron con AIBA en comparación con APS
tienen un mayor impacto en la grasa del
nematodo, pero menor impacto en el volumen.
La relación grasa-volumen indica que los
nematodos alimentados con los nanogeles son
pequeños, pero con gran cantidad de grasa, esto
comparado con el control indica que los gusanos
alimentados con los nanogeles son más grandes y
gordos.
Los resultados indican que los nanogeles tienen
cierto grado de toxicidad, lo que corrobora los
resultados obtenidos en estudios previos usando
cultivos celulares [5].
Se sabe que los materiales catiónicos interactúan
con las membranas celulares (cargadas
negativamente) provocando la ruptura de la
membrana, seguida de la entrada de Ca2+. La
elevación del Ca2+ intracelular induce la
desgranulación y el estrés oxidativo. La
consecuencia de estos efectos es la citotoxicidad
y la muerte celular [38].
Evaluar la toxicidad de nanomateriales sensibles
utilizando el sistema C. elegans es una alternativa
sólida para el desarrollo de biomateriales
considerando que se utiliza un organismo vivo
multicelular donde se puede estudiar el efecto
sobre su funcionamiento y desarrollo.
5. Conclusiones
El nematodo C. elegans demostró ser un modelo
viable para evaluar la toxicidad de nanopartículas
responsivas. Esto resulta en una alternativa
robusta para el desarrollo de biomateriales
considerando que se utiliza un organismo vivo
multicelular donde se puede estudiar el efecto
sobre su funcionamiento y desarrollo, en trabajos
a futuros se plantea realizar estudios in vitro en
las mimas condiciones y con los mismos
materiales que este trabajo y poder comparar los
efectos en los dos modelos, así como también se
plantea poder realizar estudios de cargado y
liberación de fármacos para futuros estudios in
vivo.
6. Agradecimientos
Los autores agradecen el financiamiento de la 23ª
Convocatoria Interna de Apoyo a Proyectos de
Investigación de la UABC y a la universidad de
Navarra (UNAV).
7. Reconocimiento de autoría
Alondra Montañez Rios: Conceptualización;
Metodología; Investigación; Escritura- Borrador
original; Escritura: revisión y edición. Aracely
Serrano Medina: Escritura (Revisión y Edición),
Recursos, Supervisión, administración del
proyecto, gestión de fondos. Juan M.
Irache: Metodología, validación, administración
del proyecto, recursos, supervisión. Ana L.
Martínez López: Metodología, Validación,
administración del proyecto, recursos. Ignacio
Rivero: Metodología, Validación, recursos.
Cornejo-Bravo: Conceptualización, Análisis
Formal, Visualización, Escritura (revisión y
edición).
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ISSN: 2594-1925
Referencias
[1] D. A. Castro-Vidal, D.A., C. Obeso-Vera,
K.A. Suarez-Meraz, B.M. Lara-Molinero, A.
Serrano-Medina, y J.M. "Thermal and pH
Sensitive Nano/Microgels of N -
Isopropylacrylamide and Carboxyalkyl
Methacrylates", Dig. J. Nanomater.
Biostructures, vol. 11, núm. 1, pp. 123-132,
2016.
[2] Z. Shakoori et al., "Fluorescent multi-
responsive cross-linked P(N-
isopropylacrylamide)-based nanocomposites
for cisplatin delivery", Drug Dev. Ind. Pharm.,
vol. 43, núm. 8, pp. 1283-1291, 2017.
https://doi.org/10.1080/03639045.2017.13138
59
[3] A. Serrano-Medina, J. M. Cornejo-Bravo, y
A. Licea-Claveríe, "Synthesis of Ph and
Temperature Sensitive, Core-Shell
Nano/Microgels, By One Pot, Soap-Free
Emulsion Polymerization", J. Colloid Interface
Sci., vol. 369, núm. 1, pp. 82-90, 2012.
https://doi.org/10.1016/j.jcis.2011.12.045
[4] K. Naseem, M. Atiq, U. Rehman, y R.
Huma, "A Review on Vinyl Acetic Acid Based
Polymer Microgels for Biomedical and Other
Applications", vol. 4037, núm. July, 2017.
https://doi.org/10.1080/00914037.2017.13274
34
[5] A. Serrano-Medina, I. Oroz-Parra, V. E.
Gomez-Resendiz, A. Licea-Navarro, A. Licea-
Claverie, y J. M. Cornejo-bravo, "Temperature
and pH Sensitive Core-Shell Nanogels as
Efficient Carriers of Doxorubicin with Potential
Application in Lung Cancer Treatment", vol.
4037, núm. April, 2017.
https://doi.org/10.1080/00914037.2017.12979
38
[6] W. H. Blackburn, E. B. Dickerson, M. H.
Smith, J. F. McDonald, y L. A. Lyon, "Peptide-
Functionalized Nanogels for Targeted siRNA
Delivery", Bioconjug. Chem., vol. 20, núm. 5,
pp. 960-968, 2009.
https://doi.org/10.1021/bc800547c
[7] Y. M. Zhou et al., "Deposition Transfection
Technology Using a DNA Complex with A
Thermoresponsive Cationic Star Polymer", J.
Control. Release, vol. 123, núm. 3, pp. 239-246,
2007.
https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2007.08.026
[8] A. Aqil et al., "Magnetic Nanoparticles
Coated by Temperature Responsive
Copolymers for Hyperthermia", J. Mater.
Chem., vol. 18, núm. 28, pp. 3352-3360, 2008.
https://doi.org/10.1039/b804003f
[9] M. Ballauff y Y. Lu, "'Smart' Nanoparticles:
Preparation, Characterization and
Applications", Polymer (Guildf)., vol. 48, núm.
7, pp. 1815-1823, 2007.
https://doi.org/10.1016/j.polymer.2007.02.004
[10] W. Leobandung, H. Ichikawa, Y.
Fukumori, y N. A. Peppas, "Monodisperse
Nanoparticles of Poly(Ethylene Glycol)
Macromers and N-Isopropyl Acrylamide For
Biomedical Applications", J. Appl. Polym. Sci.,
vol. 87, núm. 10, pp. 1678-1684, 2002.
https://doi.org/10.1002/app.11612
[11] C. L. Lin, W. Y. Chiu, y C. F. Lee,
"Thermal/pH-sensitive core-shell copolymer
latex and its potential for targeting drug carrier
Revista de Ciencias Tecnológicas (RECIT). Volumen 5 (3): e236
10
ISSN: 2594-1925
application", Polymer (Guildf)., vol. 46, núm.
23, pp. 10092-10101, 2005.
https://doi.org/10.1016/j.polymer.2005.07.098
[12] T. Hoare y R. Pelton, "with Physiological
Swelling Activity", Insulin, pp. 733-740, 2008.
https://doi.org/10.1021/bm701203r
[13] X. Li, X. Li, X. Shi, G. Qiu, y X. Lu,
"Thermosensitive DEA/DMA copolymer
nanogel: Low initiator induced synthesis and
structural colored colloidal array's optical
properties", Eur. Polym. J., vol. 96, pp. 484-
493, 2017.
https://doi.org/10.1016/j.eurpolymj.2017.08.02
4
[14] A. Mellati, M. Valizadeh Kiamahalleh, S.
Dai, J. Bi, B. Jin, y H. Zhang, "Influence of
polymer molecular weight on the in vitro
cytotoxicity of poly (N-isopropylacrylamide)",
Mater. Sci. Eng. C, vol. 59, pp. 509-513, 2016.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2015.10.043
[15] A. S. Wadajkar, B. Koppolu, M. Rahimi, y
K. T. Nguyen, "Cytotoxic evaluation of N-
isopropylacrylamide monomers and
temperature-sensitive poly(N-
isopropylacrylamide) nanoparticles", J.
Nanoparticle Res., vol. 11, núm. 6, pp. 1375-
1382, 2009.
https://doi.org/10.1007/s11051-008-9526-5
[16] H. Malonne et al., "Preparation of poly(N-
isopropylacrylamide) copolymers and
preliminary assessment of their acute and
subacute toxicity in mice", Eur. J. Pharm.
Biopharm., vol. 61, núm. 3, pp. 188-194, 2005.
https://doi.org/10.1016/j.ejpb.2005.05.007
[17] L. H. Lima, Y. Morales, y T. Cabral,
"Ocular Biocompatibility of Poly-N-
Isopropylacrylamide (pNIPAM)", J.
Ophthalmol., vol. 2016, 2016.
https://doi.org/10.1155/2016/5356371
[18] P. Van De Wetering, E. E. Moret, N. M. E.
Schuurmans-Nieuwenbroek, M. J. Van
Steenbergen, y W. E. Hennink, "Structure-
activity Relationships of Water-Soluble
Cationic Methacrylate/methacrylamide
Polymers For Nonviral Gene Delivery",
Bioconjug. Chem., vol. 10, núm. 4, pp. 589-
597, 1999. https://doi.org/10.1021/bc980148w
[19] L. Kou, Y. D. Bhutia, Q. Yao, Z. He, J.
Sun, y V. Ganapathy, "Transporter-Guided
Delivery Of Nanoparticles To Improve Drug
Permeation Across Cellular Barriers And Drug
Exposure To Selective Cell Types", Front.
Pharmacol., vol. 9, núm. JAN, pp. 1-16, 2018.
https://doi.org/10.3389/fphar.2018.00027
[20] E. Blanco, H. Shen, y M. Ferrari,
"Principles of Nanoparticle Design for
Overcoming Biological Barriers To Drug
Delivery", Nat. Biotechnol., vol. 33, núm. 9, pp.
941-951, 2015.
https://doi.org/10.1038/nbt.3330
[21] E. Fröhlich, "The Role Of Surface Charge
In Cellular Uptake And Cytotoxicity Of
Medical Nanoparticles", Int. J. Nanomedicine,
vol. 7, pp. 5577-5591, 2012.
https://doi.org/10.2147/IJN.S36111
[22] A. C. Anselmo y S. Mitragotri,
"Nanoparticles in the Clinic: An Update",
Bioeng. Transl. Med., vol. 4, núm. 3, pp. 1-16,
2019. https://doi.org/10.1002/btm2.10143
Revista de Ciencias Tecnológicas (RECIT). Volumen 5 (3): e236
11
ISSN: 2594-1925
[23] H. R. Culver, J. R. Clegg, y N. A. Peppas,
"Analyte-Responsive Hydrogels: Intelligent
Materials for Biosensing and Drug Delivery",
Acc. Chem. Res., vol. 50, núm. 2, pp. 170-178,
2017.
https://doi.org/10.1021/acs.accounts.6b00533
[24] J. R. Clegg et al., "Synthetic Networks
With Tunable Responsiveness, Biodegradation,
And Molecular Recognition For Precision
Medicine Applications", Sci. Adv., vol. 5, núm.
9, pp. 1-16, 2019.
https://doi.org/10.1126/sciadv.aax7946
[25] P. Ferro, L. Katerine, G. Bustos, y A.
Viviana, "Caracterización Fenotípica De La
Cepa N2 De Caenorhabditis Elegans Como Un
Modelo En Enfermedades
Neurodegenerativas", pp. 69-78.
[26] T. Wu, H. Xu, X. Liang, y M. Tang,
"Caenorhabditis Elegans as a Complete Model
Organism For Biosafety Assessments Of
Nanoparticles", Chemosphere, vol. 221, pp.
708-726, 2019.
https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2019.01
.021
[27] L. González-Moragas, A. Roig, y A.
Laromaine, "C. elegans as a Tool For In Vivo
Nanoparticle Assessment", Adv. Colloid
Interface Sci., vol. 219, pp. 10-26, 2015.
https://doi.org/10.1016/j.cis.2015.02.001
[28] G. M. Solis y M. Petrascheck, "Measuring
Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well
Microtiter Plates", núm. March, pp. 1-6, 2011.
https://doi.org/10.3791/2496
[29] J. S. Gutierres Sánchez, H. S. Castro
Cárdenas, S. E. Giraldo Quintero, Y. Y. Lozano
Jiménez, y R. M. Sánchez Mora,
"Caenorhabditis Elegans Como Modelo De
Estudio De Enfermedades
Neurodegenerativas", Ámbito Investig., vol. 5,
núm. 2, pp. 24-33, 2020.
[30] M. Uno y E. Nishida, "Lifespan-regulating
Genes in C. Elegans", npj Aging Mech. Dis.,
vol. 2, núm. 1, 2016.
https://doi.org/10.1038/npjamd.2016.10
[31] A. K. Corsi, B. Wightman, y M. Chalfie,
"A Transparent Window Into Biology: A
Primer On Caenorhabditis Elegans", Genetics,
vol. 200, núm. 2, pp. 387-407, 2015.
https://doi.org/10.1534/genetics.115.176099
[32] A. Bansal, L. J. Zhu, K. Yen, y H. A.
Tissenbaum, "Uncoupling Lifespan and
Healthspan in Caenorhabditis Elegans
Longevity Mutants", Proc. Natl. Acad. Sci. U.
S. A., vol. 112, núm. 3, pp. E277-E286, 2015.
https://doi.org/10.1073/pnas.1412192112
[33] A. V. G. Bustos, M. G. Jiménez, y R. M.
S. Mora, "The Annona Muricata Leaf Ethanol
Extract Affects Mobility and Reproduction In
Mutant Strain NB327 Caenorhabditis Elegans",
Biochem. Biophys. Reports, vol. 10, pp. 282-
286, 2017.
https://doi.org/10.1016/j.bbrep.2017.04.016
[34] D. Colmenares, Q. Sun, P. Shen, Y. Yue,
D. J. McClements, y Y. Park, "Delivery of
Dietary Triglycerides To Caenorhabditis
Elegans Using Lipid Nanoparticles:
Nanoemulsion-based delivery systems", Food
Chem., vol. 202, pp. 451-457, 2016.
Revista de Ciencias Tecnológicas (RECIT). Volumen 5 (3): e236
12
ISSN: 2594-1925
https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2016.02.02
2
[35] E. Sánchez, "Estudio De Un Modelo In
Vivo De Los Mecanismos De Acción
Implicados En La Actividad Biológica De
Polifenoles." ' Evaluation Of Mechanisms of
Action Involved In The Biological Activity Of
Polyphenols Using An In Vivo Model.'", p. 31,
2017.
[36] L. Brannon-Peppas y J. O. Blanchette,
"Nanoparticle and Targeted Systems for Cancer
Therapy", Adv. Drug Deliv. Rev., vol. 64, núm.
SUPPL., pp. 206-212, 2012.
https://doi.org/10.1016/j.addr.2012.09.033
[37] M. J. Mitchell, M. M. Billingsley, R. M.
Haley, M. E. Wechsler, N. A. Peppas, y R.
Langer, "Engineering Precision Nanoparticles
for Drug Delivery", Nat. Rev. Drug Discov.,
vol. 20, núm. 2, pp. 101-124, 2021.
https://doi.org/10.1038/s41573-020-0090-8
[38] T. L. Hwang, I. A. Aljuffali, C. F. Lin, Y.
T. Chang, y J. Y. Fang, "Cationic Additives In
Nanosystems Activate Cytotoxicity And
Inflammatory Response Of Human
Neutrophils: Lipid Nanoparticles Versus
Polymeric Nanoparticles", Int. J.
Nanomedicine, vol. 10, pp. 371-385, 2015.
https://doi.org/10.2147/IJN.S73017
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